ARTICULO ORIGINAL Methodo 2017;2(3): 79- 89
DOI: 10.22529/me.2017.2(3 )02
Recibido 19 Jun 2017 | Aceptado 30 Jul 2017 | Publicado 30 Sep 201 7
Identificación de población de riesgo para alergia a la leche de vaca
Identification of population at risk for allergy to cow's milk
Boudet RV1, Copioli JC2, Muiño JC3, Geréz de Burgos N1, Chaig MR1, Damilano G4, Chaig R .
Resumen
ANTECEDENTES: Los genotipos asociados con la alergia a la leche de vaca (ALV) son desconocidos. Aún no han podido ser replicados en poblaciones independientes, y podrían ser responsables de la marcada variabilidad de la respuesta clínica individual a las p roteínas lácteas.
OBJETIVO: Caracterizar haplogrupos, de la Región D-Loop del ADN mitocondrial, en un grupo de niños ALV, con el fin de arribar a un mejor conocimiento de la herencia biológica y genética en la etiología de la enfermedad.
POBLACION Y METODO: Diseño: Análisis de mutaciones o variantes de la región D-loop del genoma mitocondrial. Población: 41 niños de ambos sexos de 0-2 años, 11 alérgicos ALV y 30 controles. (Río Cuarto, Córdoba, Argentina) Los pacientes ALV se dividieron, según la sintomatología que presentaban en 6 casos con Dermatitis Atópica (DA) + Enfermedad
Gastrointestinal (EGI) y en 5 casos con Rinitis y Asma (RA).
La Región D-Loop del genoma mitocondrial se amplificó por PCR. El análisis filogenético fue calculado usando el programa CLUSTAL OMEGA, the Neighbor-Joining, BLOSUM62, con los datos estudiados y grabados por Jukes-Cantor y luego con Kimura-2, programas específicos disponibles (software).
RESULTADOS: Se encontró una mutación o variante nucleotídica no descripta T16519C en la transición de haplogrupos asociada a pacientes ALV con DA+EGI en 6/6 casos, comparados con 5/5 casos con RA que no la presentaron, mientras que en los controles se la observó solo en 6/30, p=0,0312; RR 2,900.
CONCLUSIONES: Estos hallazgos sugieren que esta mutación probablemente aumente la posibilidad de padecer ALV asociada con DA+EGI .
Palabras Claves: Alergia a la leche de vaca, haplogrupos, niños, mutación no descripta, genoma mitocondrial
Abstract
BACKGROUND: Genotypes associated to cow's milk allergy (CMA) are unknown. They have not been replicated in independent populations, and could be responsible for the marked variability in individual clinical response to milk proteins.
OBJECTIVE: To characterize haplogroups of the D-Loop region of mitochondrial DNA in a group of children allergic to cow's milk in order to arrive at a better understanding of biological and genetic heritability in the etiology of the disease.
POPULATION AND METHOD: Design: Analysis of mutations or variants of the D-loop of mitochondrial genome region. Population: 41 children of both sexes from 0-2 years, 11 with CMA and 30 healthy subjects (controls). (Río Cuarto, Córdoba, Argentina). The CMA patients
were divided according to the symptoms presenting in: 6 cases with Atopic Dermatitis (AD) +
Revista Methodo: Investigación Aplicada a las Ciencias Biológicas. Facultad de Medicina. Universidad
Católica de Córdoba. Jacinto Ríos 571 Bº Gral. Paz. X5004FXS. Córdoba. Argentina. Tel.: (54) 351 4517299 / Correo: methodo@ucc.edu.ar / Web: methodo.ucc.edu.ar | ARTICULO ORIGINAL Methodo 2017;2(3): 79- 89
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Gastrointestinal disease (GID) and in 5 cases with Rhinitis and Asthma (RA). The D- Loop Region of mitochondrial genome was amplified by PCR. Phylogenetic analysis was calculated using the program CLUSTAL OMEGA, the Neighbor-Joining, BLOSUM62, with studied and recorded by Jukes-Cantor data and then with Kimura-2, available specific programs (software). RESULTS: We found a non-descript mutation or variant nucleotide T16519C in the transition of haplogroups associated with CMA patients with AD+ GID in 6/6 cases, compared with 5/5 cases with RA that failed it, whereas in controls was observed it only in 6/30, p = 0, 0312 RR 2,900.
CONCLUSIONS: These features suggest that this mutation probably increases the possibility of suffering CMA associated with AD + GID.
Key words: Cow´s Milk Allergy, haplogroups, children, not decipher mutation, mitochondrial genome. .
1. Cátedra de Bioquímica y Biología Molecular, Universidad Nacional de Córdoba (UNC) 2. Cátedra de Unidad Hospitalaria de Medicina interna Nº 1 Hospital Córdoba Facultad de Ciencias Médicas (FCM) , UNC 3. Cátedra de Unidad Hospitalaria de Medicina interna Nº 4 Hospital Misericordia, FCM, UNC, 4. Facultad de Ciencias Humanas, Universidad Nacional de Río Cuarto. 5. Ex Profesor Titular de La Cátedra de Operaciones 1- en la Carrera de Ingeniería Química – Universidad Tecnológica de C órdoba.
Correspondencia: Raúl Vicente Boudet, Domicilio: Mendoza 844 (5800) Río Cuarto,
e-mail: rulovboudet@yahoo.com.ar
INTRODUCCIÓN
La alergia a los alimentos es un problema de salud pública a nivel global. Su incidencia ha aumentado en la última década más rápidamente de lo que permitirían los cambios en el genoma. Sin embargo, todavía no se ha podido determinar cuáles son los factores ambientales que podrían interactuar con el riesgo adquirido genéticamente para desarrollar la enfermedad (1, 2). Algunos individuos poseen factores genéticos que confieren susceptibilidad o resistencia a una determinada patología en un entorno particular .
La historia familiar es un potente factor de riesgo para el desarrollo de la alergia alimentaria. Hay buena evidencia proveniente de estudios en gemelos, que señalan la importancia de
la variación genética, más aún cuando se asocia con otras enfermedade s atópicas (3, 4, 5). La predisposición genética conduce a la producción de citocinas predominantemente TH2 (IL - 4, IL-5, IL-9 y IL-13) que contribuyen a la sensibilización alérgica, originada en defectos intrínsecos de células T o de células presentadoras de antígenos (6). La alergia a la leche de vaca (ALV) es la principal causa de alergia alimentaria, afecta mayormente a los niños y no existe suficiente información referente a tendencias geográficas en su desarrollo. En ese sentido, los genotipos asociados con la ALV son desconocidos (aún no han podido ser replicados en poblaciones independientes) y podrían ser responsables de la marcada variabilidad de la respuesta clínica
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individual a las proteínas lácteas (7). Por eso, en la actualidad el riesgo de padecer ALV es definido de acuerdo a los antecedentes familiares (8, 9).
La población humana ha acumulado un alto número de substituciones de bases en el ADN mitocondrial (ADNmt) a lo largo de linajes maternales, en los cuales las combinaciones específicas constituyen los hapl ogrupos mitocondriales supuestos (10, 11). Los haplogrupos ADNmt específicos para una población, pueden ser funcionalmente diferentes y ejercer influencias que podrían afectar los resultados de las enfermedades, ya sea exacerbando, retrasando o bien aminorando la sintomatología dada (12, 13, 14).
El avance en los estudios de secuenciación de la Región Hiper - variable uno (HVI) de la región D- Loop en el ADNmt ha revelado que la tasa de mutación es diferente a lo largo del segmento. Algunas posiciones de la Región HVI, son extremamente variables entre los linajes, mientras que otras, relativamente constantes (15).
El objetivo de esta investigación fue caracterizar haplogrupos de la Región D-Loop del ADN mitocondrial, en un grupo de niños alérgicos a la leche de vaca, con el fin de arribar a un mejor conocimiento de la herencia biológica y genética en la etiología de la enfermedad.
P O B L A C I O N Y M É T O D O S Se estudiaron, 41 niños de 0 a 2 años de edad y de ambos sexos, que viven en la ciudad de Río Cuarto, Córdoba, Argentina. Once (11) de ellos tenían diagnóstico de ALV y treinta (30) individuos sanos conformaron el grupo control. En todos los pacientes el diagnóstico se confirmó, luego de dos semanas de exclusión del alimento, por medio del desafío oral abierto,
atendiendo a razones prácticas como son la corta edad de los niños y la baja sensibilidad de las pruebas diagnósticas realizadas (RAST IgE específica y Prick Test con extractos estandarizados).
Los niños ALV se dividieron de acuerdo al tipo de manifestaciones clínicas con que iniciaron la enfermedad en 6 casos con Dermatitis Atópica (DA) + Enfermedad Gastrointestinal (EGI) y en 5 casos con Rinitis y Asma (RA).
La región D-Loop y sus segmentos o Regiones Hipervariables HVI, HVII y HVIII del Genoma mitocondrial (Gmt), fue amplificada por Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). Los “primers” utilizados fueron: Fw 16033 a 16055 y Rev. 50 a 29 (RHVI); Fw 29 a 51 y Rev. 713 a 693 (HVII y III). Las condiciones de la mezcla de incubación, para amplificar los productos en la PCR, tenían una temperatura de annelling (para los diferentes segmentos) en un rango de
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56ºC a 58ºC. Posteriormente se realizó electroforesis en geles de agarosa al 2%, para la visualización de las bandas de ADN, con luz UV. Cada fragment o fue purificado y mandado a secuenciar para su análisis (dos determinaciones). Los resultados fueron comparados con la puesta del Consenso de la secuencia de Cambridge (GenBank Accession No.: NC_012920.1). Además, se utilizó la base de datos de GenBank
(h ttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/ MITOMAP), y las base de datos The Human Mitochondrial Genome Database H.M.G.D. (www.mitomap.org; www.genpat.uu.se/mtDB/).
Análisis Estadístico
Para determinar la asociación entre los haplogrupos y la enfermedad, se utilizaron tablas de contingencia y cálculo de riesgo (OR). El resumen estadístico de la diversidad genética fue calculado usando el programa CLUSTAL OMEGA versión 2.0.12 (Múltiples Alineaciones de la Secuencia). Para la filogenia se u tilizó el Neighbor-Joining (NJ), BLOSUM62 (BLOcks of Amino Acid SUbstitution
Matrix, o matriz de sustitución de bloques de aminoácidos) con datos estudiados y registrados por Jukes - Cantor y luego con Kimura-2 (16, 17, 18, 19).
Finalmente, se generaron nue vos árboles filogenéticos utilizando los métodos de Average distance tree using PID; Neighbour Joining tree using PID, Average distance tree using BLOSUM62, con el fin de compararlos con los obtenidos.
Consideraciones éticas
Este estudio se realizó previo consentimiento informado y se con la normativa de la Declaración de Helsinki, Buenas Prácticas Clínicas de ANMAT y Ley Provincial N° 9694. El estudio fue aprobado Comité de Bioética del Ministerio de Salud, Gobierno de la Provincia de Córdoba. Resolución Nº 296. .
Se asegura protección de datos personales de los pacientes según la Ley 25.326. Los autores declaran no tener conflictos de intereses.
R E S U L T A D O S
La Región D-Loop del Gmt fue comparada con cada matriz de la Región Hipervariable (HVI, HVII y HVIII) de cada paciente (paso 1). Se observó que las variantes de la Región HVI, se distribuyen acercándose o
alejándose del Gmt. El árbol filogenético usado para guía del proceso de múltiple alineamiento final, se calculó de la distancia matriz del paso 1, usando Neighbour Joining method. Este árbol indica qué
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pacientes o controles se alejan más del ADNmt. El paciente 13a BS, fue, en
Tabla 1. Haplogrupos y variantes genéticas en los niños estudiados
nuestra investigación, el más próximo al Gmt, el 2a CG el más alejado, y el 1a MJC está ancestrado con el Gmt y con 13a BS, pero se aleja ancestralmente de los otros. El árbol dibujado para la HVII y HVIII, no refleja lo mismo , aunque si lo hace para 2b CG y 17b LB. Esto demuestra los cambios sufridos en el tiempo para ciertas variables (cambios nucleotídicos). En la Tabla 1, se muestran los haplogrupos y la identificación de cada variante o mutación de la población estudiada, en las Regiones HVI, HVII y HVIII, siguiendo los datos registrados en el mapa genético (www.mitomap.org; www.genpat.uu.se/mtDB). Tanto los niños ALV como los controles, presentaron prevalencia de
HAPLOGRUPOS
WT, A+C B
(Europa, Asia)
RXIZGDZV, A+C+B (Europa, Asia) ACBV
(Asia, Europa) WDEG, ACB (Europa, Asia)
RXIZGD, UK,Hvgroup; Q, A+C1+B (Europa, Asia)
B++ AC1
(Asia)
UK, Hvgroup, Q, Z, V, A+C1B (Europa, Asia)
T, J, Tjgroup, WT, A+ C+
(Europa, Asia)
Q
(Asia)
T, J, Tjgroup, UK, Hvgroup, Q, DE, A++C+B
(Europa, Asia )
ACB
(Asia)
Total
prevalencia del haplogrupo C; TJ group; y de la mutación o variante no descripta T16519C (Figura 1) .
n
2
10
1
5
5
1
6
6
1
1
3
41
los siguientes haplogrupos:
RXIZGDZV; A+C+B; TJgroup;
UK,HVgroup; q; z; v; A+C1B y ACB, (el signo+ indica frecuencia). En la Tabla 2, se señala su distribución porcentual por áreas geográficas. Además, se identificó cada variante, su frecuencia, su pertenencia a un haplogrupo o no, si es una variable identificada en el (www.mitomap.org; www.genpat.uu.se/mtDB/), con que otras variantes se encuentra asociada y de qué región ancestral proviene. Este procedimiento permitió observar la
El diagnóstico de ALV y la presencia de la variante nucleotídica no descripta T16519C se asociaron significativamente al 10% (p=0,095); Coeficiente de contingencia=0,252 (Prueba chi-cuadrado para la asociación entre grupo de pertenencia y presencia de la mutación). Un paciente que posea dicha mutación, tiene mayor probabilidad de ser ALV que aquel que no la presenta: OR=3,300, IC95% 0,785; 13,879 ( Tabla 3) .
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La evaluación del indicador pudo resumirse como: Área ROC global 64%; Sensibilidad 55%; Especificidad 73%; Predictivo Positivo 43%; Predictivo Negativo 82%.
Se halló a la variante T16519C no descripta en la transición de haplogrupos asociada con los pacientes ALV que iniciaron la enfermedad con m anifestaciones clínicas de Dermatitis Atópica (DA) + Enfermedad Gastrointestinal (EGI) en
6/6 pacientes, mientras que no hubo asociación en 5/5 pacientes que presentaron manifestaciones clínicas de inicio de Rinitis y Asma (RA), p=0.0001.
En el grupo control solo 6/30 individuos poseían la variante T16519C no descripta con una asociación también significativa, p = 0, 0312 RR 2, 900
(Figura 2) .
Tabla 2. Distribución de haplogrupos por regiones geográficas en el grupo de niños alérgicos a la leche de vaca y en los c ontroles
HAPLOGRUPO
Controles (n)
ALV
(n)
Controles (%)
ALV
(% )
Total (% )
Europeo 21 9 51,22 21,95 73,17
Asiático – Europeo 5 0 12,20 0,00 12,20
Asiático - Americano 3 2 7,32 4,88 12,20
Africano 1 0 2,44 0 2,44
Sub-Total 30 11 73,17 26,83 100,00
ALV=grupo conformado por niños alérgicos a la leche de vaca
Controles=grupo de niños sanos
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n
Figura 1. Prevalencia de haplogrupos y de la variante no descripta T16519C
en los niños estudiados
Tabla 3. Presencia de la variante no descripta (T16519C) en niños alérgicos a la leche de
vaca vs. c ontroles
Grupo
Variante no descripta (T16519)
ALV Controles Total
NO n 5 22 27
% dentro de Mutación 18,5% 81,5% 100,0%
% dentro de Grupo 45,5% 73,3% 65,9%
% del total 12,2% 53,7% 65,9%
SI n 6 8 14
% dentro de Mutación 42,9% 57,1% 100,0%
% dentro de Grupo 54,5% 26,7% 34,1%
% del total 14,6% 19,5% 34,1%
Total Recuento (n) 11 30 41
% dentro de Mutación 26,8% 73,2% 100,0%
% dentro de Grupo 100,0% 100,0% 100,0%
% del total 26,8% 73,2% 100,0%
ALV=grupo conformado por niños alérgicos a la leche de vaca
Controles=grupo de niños sanos
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n= 41
p=0.0001
DA+EGI R+A
Figura 2. Relación entre manifestaciones clínicas y la presencia de la variante no descripta T16519C en niños alérgicos a la leche de vaca vs.controles ALV= grupo de niños alérgicos a la leche de vaca; Controles: pacientes sanos DA/EGI= Dermatitis Atópica/Enfermedad Gastrointestinal
R/A= Rinitis/Asma
D I S C U S I Ó N
En los últimos años se han descrito respuesta a alérgenos alimentarios,
mutaciones que se han asociado con promete identificar mecanismos
síndromes clínicos bien definidos. Las características genéticas del ADNmt, herencia materna, poliplasmia y segregación mitótica, confieren a estas
involucrados en determinar el desar rollo de la tolerancia inmunológica o en su defecto la enfermedad alérgica (20). En este sentido, la variabilidad clínica
enfermedades propiedades muy observada en la presentación de la ALV,
particulares. Las manifestaciones clínicas de estas patologías son muy heterogéneas y afectan a distintos órganos y tejidos por lo que su correcto
podría explicarse en parte, por la presencia de polimorfismos en genes candidatos que influyen en su desarrollo.
diagnóstico implica la obtención de Las variaciones nucleotídicas
datos clínicos, morfológicos, encontradas en el ADNmt humano
bioquímicos y genéticos.
Por otra parte, la investigación de las diferencias genéticas subyacentes, heredadas por individuos predispuestos a la producción de células TH2, en
determinan los haplogrupos, los cuales trazan la ascendencia matrilineal hasta los orígenes de la especie humana en África y desde allí a su dispersión geográfica global. Los haplogrupos más
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antiguos son más grandes y se encuentran más dispersos y de ellos descienden numerosos subgrupos. La migración, dando por resultado el aislamiento de la población, es una de las cuatro fuerzas evolutivas junto a la selección natural, deriva genética y mutación. La disciplina de genética de la población (Gp), es el estudio de la distribución de frecuencias y del cambio en la variación del gen (alelo) bajo tales influencias (21).
La Gp observada en poblaciones modernas, ha abierto una ventana en los patrones históricos de migraciones, con una técnica iniciada por Luigi Luca Cavalli-Sforza (22).
Nuestro estudio, se concentró en
representan la posible relación entre las distintas especies en estudio. El común ancestro más reciente es el ADNmt, con quién se alinearon cada uno de los niños incluidos en este estudio.
El interrogatorio realizado a sus padres, denunció un origen ancestral como descendientes de españoles, italianos y criollos. Sin embargo, la presencia del haplogrupo Q que deriva del M y éste del L3 (Africano), en este grupo de niños, indicaría migración que da or igen a la diversidad del mestizaje (22, 23). Por otra parte, no es frecuente que los niños ALV comiencen la enfermedad con la afectación del sistema respiratorio, como única manifestación clínica (8). Al respecto, la variante no
conocer además de los haplogrupos descripta (cambio nucleotí dico
nativos en América, qué otros haplogrupos en el ADNmt se presentan
T16519C) estuvo presente solo en los niños ALV que iniciaron la enfermedad
en la población estudiada (mediados por con manifestaciones clínicas
la inmigración y el medio ambiente u otros factores) y de qué manera influyen en el desarrollo de la enfermedad ALV. Para observar las posibles relaciones genealógicas entre los distintos compases, utilizamos una técnica común en el análisis filogenético que nos ayudara a analizar y visualizar el conjunto de datos obtenidos en el cuadro (matriz) de distancias. Esta técnica de análisis de datos se basa en la generación de los llamados árboles filogenéticos, que son estructuras geométricas de interconexión que
gastrointestinales y dérmicas. C O N C L U S I O N E S
La variante no descripta (T16519C) se presentó con mayor frecuencia en los niños que habían sido diagn osticados como ALV.
El riesgo de desarrollar ALV fue 3 veces más elevado en los pacientes que la poseían.
Todos los niños ALV que iniciaron la enfermedad con manifestaciones clínicas de Dermatitis Atópica (DA) y Enfermedad Gastrointestinal (EGI), la
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presentaron. Esto sugiere que la presencia de esta mutación probablemente aumente la posibilidad de padecer ALV asociada con DA+EGI. En el desarrollo de la ALV estarían involucrados además del ADN mitocondrial otros genes nucleares y factores epigenéticos que hacen al fenoma y quizás al proteoma. Futuras
investigaciones que involucren al Gmt completo, serán necesarias para poder correlacionar las variantes de la Región Control D-Loop con el o los haplogrupos correspondientes, lo que resultaría en los haplotipos o subhaplotipos que las caracterizan, tanto para la variante no descripta T16519C como para otras hipotéticas .
BIBLIOGRAFÍA
1. Leung PSC, Shu S-A, Chang C. 9. AmericanCommitteeAcademyon Nutrition.of Pediatrics Clinic Rev Allerg Immunol 2014; Hypoallergenic infant formulae. 46:169-179 Pediatrics 2000; 106:346- 49.
2. Tan N TH, Ellis JA, Saffery R, Allen 10. Muraro A, Werfel T, Hoffmann -
KJ. The role of genetics and Sommergruber K, Roberts G et al. environment in the rise of childhood EAACI Food Allergy and
food allergy. Clin Exp Allergy 2012; Anaphylaxis Guidelines
42:20-29. Group. EAACI Food Allergy and
3. Rona RJ, Keil T, Summers C, Anaphylaxis Guidelines. Diagnosis Gislason D, Zuidmeer L, Sodergren and management of food
E, et al. The prevalence of food allergy. Allergy 2014; 69: 1008 – allergy: a meta-analysis. J Allergy 1025.
Clin Immunol 2007; 120:638-46. 11. Wallace DC, Brown MD, Lott MT. 4. Hourihane JO, Dean TP, Warner Mitochondrial DNA variation in JO. Peanut allergy in relation to human evolution and disease. heredity, maternal diet, and other Gene 1999; 238:211- 30. atopic diseases: results of a 12. Torroni A, Wallace DC. questionnaire survey, skin prick Mitochondrial DNA variation in testing, and food challenges. human populations and BMJ1996; 313:518-21. implications for detection of
5. Tsai HJ, Kumar R, Pongracic J. mitochondrial DNA mutations of Familial aggregation of food allergy pathological significance. J
and sensitization to food allergens: Bioenerg Biomembr 1994; 26:261 - a family-based study. Clin Exp 71.
Allergy 2009; 39:101-9. 13. Brown MD, Torroni A, Reckord CL, 6. Chinthrajah RS, Hernandez Wallace DC. Phylogenetic analysis JD, Boyd SD, Galli SJ, Nadeau KC .
Molecular and cellular mechanisms of Leber’s hereditary optic
of food allergy and food tolerance. neuropathy mitochondrial DNA’s
J Allergy Clin Immunol. 2016 indicates multiple independent ;137(4):984-97. occurrences of the common
7. Ortolani C, Pastorello EA. Food mutations. Hum Mutat 1995; 6:311 - allergies and food intolerances. 25.
Best Pract Res Clin Gastroenterol 14. Kofler B, Mueller EE, Eder W, 2006; 20:467-83. Stanger O, Maier R, Weger M, 8. Fiocchi A, Brozek J, Schunemann HasshaplogroupA, et al.T isMitochondrialassociated with DNA
H, Bahna SL, Von Berg A, Beyer K, coronary artery disease an d
et al. World Allergy Organization diabetic retinopathy: a case control (WAO) Diagnosis and Rationale for study. BMC Med Genet 2009; Action against Cow’s Milk Allergy 10:35- 42.
(DRACMA) Guidelines. Pediatr
Allergy Immunol 2010; 21:1- 125.
Revista Methodo: Investigación Aplicada a las Ciencias Biológicas. Facultad de Medicina. Universidad Católica de Córdoba. Jacinto Ríos 571 Bº Gral. Paz. X5004FXS. Córdoba. Argentina. Tel.: (54) 351 4517299 / Correo: methodo@ucc.edu.ar / Web: methodo.ucc.edu.ar | DOI: 10.22529/me.2017.2(3)02
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Boudet RV, Copioli JC, Muiño JC, Geréz de Burgos N, Chaig MR, Damilano G, Chaig R. Identificación de población de riesgo para alergia a la leche de vaca
15. Wakeley J. Substitution rate variation among sites in hypervariable region 1 of human mitochondrial DNA. J Mol Evol 1993; 37:613- 23.
16. Saitou N, Nei M. The Neighbor - joining Method: A New Method for Reconstructing Phylogenetic Trees. Mol. Biol. Evol. 1987; 4(4):406- 425. 17. Eddy SR. Where did the BLOSUM62 alignment score matri x come from? Nat Biotechnol. 2004; 22(8):1035- 6.
18. Jukes TH and Cantor CR (1969). Evolution of Protein Molecules. New York: Academic Press. pp. 21– 132.
19. Kimura M (1980). "A simple method for estimating evolutionary rates of base substitutions through comparative studies of nucleotide sequences". Journal of Molecular Evolution 16 (2): 111– 120.
20. Bedoret D, Singh AK, Shaw V, Hoyte EG, Hamilton R, DeKruyff RH, et al. Changes in antigen -
specific T cell number and function
during oral desensitization in cow’s milk allergy enabled with omalizumab. Mucosal Immunol. 2012; 5: 267- 76.
21. Rieder MJ, Tayler SL, Tobe VO, Nickerson DA. Automating the identification of DNA variatio ns using quality-based fluorescence re-sequensing: Analysis of the human mitochondrial genome. Nucleic Acids Res. 1998; 26: 967 - 73.
22. Piazza A, Rendine S, Minch E, Menozzi P, Mountain J, Cavalli - Sforza LL. Genetics and the origin of European languages. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1995; 92:5836- 40. 23. Fagundes N, Kanitz R, Eckert R. Mitochondrial population genomics supports a single pre-Clovis origin with a coastal route for the peopling of the Americas. Book: Biomolecular Archaeology: An Introduction 2008; 284- 86.
Revista Methodo: Investigación Aplicada a las Ciencias Biológicas. Facultad de Medicina. Universidad Católica de Córdoba. Jacinto Ríos 571 Bº Gral. Paz. X5004FXS. Córdoba. Argentina. Tel.: (54) 351 4517299 / Correo: methodo@ucc.edu.ar / Web: methodo.ucc.edu.ar | DOI: 10.22529/me.2017.2(3)02
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