Revista Methodo: Investigación Aplicada a las Ciencias Biológicas. Universidad Católica de Córdoba. Jacinto
Ríos 571 Bº Gral. Paz. X5004FXS. Córdoba. Argentina. Tel.: (54) 351 4517299 / Correo: methodo@ucc.edu.ar
/ Web: methodo.ucc.edu.ar | ARTICULO ORIGINAL Rev. Methodo 2025;10(1):S 05-08.
ARTICULO ORIGINAL Rev. Methodo 2025;10(1) :S 05-08
https://doi.org/10.22529/me.2025.10S(1)02
Recibido 03 Nov. 2025 | Publicado 19 Dic. 2025
Efecto de levaduras probióticas del género Kluyveromyces en
el espesor de la capa de mucus intestinal de cerdos al destete
Effect of probiotics yeast of the genus Kluyveromyces on
intestinal mucus layer thickness in weaning piglets
Aurora Guadalupe Sánchez Croce
1,2
, Martín Rumbo
2
, Malena María Ferreyra
2
, Graciela
Liliana Garrote
3
, María Alejandra Machuca
1
1.
Laboratorio de Patología Especial Veterinaria Dr Bernardo Epstein, LAPEVET (FCV - UNLP).
2.
Instituto de Estudios Inmunológicos y Fisiopatológicos, IIFP (UNLP-CONICET-Centro Asociado CICPBA).
3.
Centro Investigación y Desarrollo en Ciencia y Tecnología de Alimentos, CIDCA (CONICET-UNLP-CICPBA).
Correspondencia: Aurora Guadalupe Sánchez Croce. Email: [email protected]m
Resumen
El síndrome de estrés posdestete induce la disbiosis e inflamación intestinal, afectando negativamente la
salud y productividad de los lechones. Como alternativa al uso de antibióticos como promotores del
crecimiento, nuestro grupo viene evaluando la administración de levaduras probióticas de la especie
Kluyveromyces marxianus para facilitar el establecimiento de una microbiota adecuada, resultando en
menores tasas de diarreas y mejor conversión del alimento (Pendón et al., 2021). El objetivo de este trabajo
fue comparar el espesor de la capa de mucus, la primera barrera de defensa del intestino, entre un grupo de
cerdos suplementados (incluyendo suplementación materna) y un grupo control no suplementado. Para ello,
se utilizaron técnicas histoquímicas como la tinción Periodic Acid Schiff-Alcian Blue (PAS-AB) y
lectinhistoquímica con el uso de la lectina Glycine Max (SBA). Los resultados mostraron que los lechones
suplementados presentaron una capa de mucus significativamente más gruesa (SBA: 4,56 µm; PAS-AB:
3,99 µm) que el grupo control (SBA: 3,12 µm; PAS-AB: 3,07 µm). Estos hallazgos indican una barrera
intestinal más robusta en el grupo suplementado, lo que sugiere que K. marxianus impacta positivamente
en la integridad intestinal y en la protección frente a patógenos durante el período crítico del posdestete
Palabras claves: probióticos, salud intestinal, lechones, lectinhistoquímica, PAS-AB.
Abstract
Post-weaning stress syndrome induces dysbiosis and intestinal inflammation, negatively affecting the
health and productivity of piglets. As an alternative to the use of antibiotic growth promoters, our group
has been evaluating the administration of probiotic yeasts of the species Kluyveromyces marxianus to
induce the establishment of a balanced intestinal microbiota, resulting in lower diarrhea rates and improved
feed conversion (Pendón et al., 2021). The objective of this study was to compare the thickness of the
mucus layer—the first line of intestinal defense—between a group of supplemented pigs (including
maternal supplementation) and an unsupplemented control group. Histochemical techniques, such as
Periodic Acid Schiff–Alcian Blue (PAS-AB) staining, and lectin histochemistry using Glycine max (SBA)
lectin were employed. Results showed that supplemented piglets exhibited a significantly thicker mucus
layer (SBA: 4.56 µm; PAS-AB: 3.99 µm) compared to the control group (SBA: 3.12 µm; PAS-AB: 3.07
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Sánchez Croce A.G, Rumbo M, Ferreyra M, Garrote G.L, Machuca M. Efecto de levaduras probióticas del género
Kluyveromyces en el espesor de la capa de mucus intestinal de cerdos al destete
Revista Methodo: Investigación Aplicada a las Ciencias Biológicas. Universidad Católica de Córdoba. Jacinto
Ríos 571 Bº Gral. Paz. X5004FXS. Córdoba. Argentina. Tel.: (54) 351 4517299 / Correo: methodo@ucc.edu.ar
/ Web: methodo.ucc.edu.ar | ARTICULO ORIGINAL Rev. Methodo 2025;10(1):S 05-08.
µm). These findings indicate a more robust intestinal barrier in the supplemented group, suggesting that K.
marxianus positively impacts intestinal integrity and protection against pathogens during the critical post-
weaning period.
Keywords: probiotics, intestinal health, piglets, lectinhistochemistry, PAS-AB.
Introducción
En los sistemas de producción porcina intensiva,
el síndrome de estrés posdestete ocurre
especialmente cuando el destete se realiza a los
21 días de edad. Para los lechones, esta práctica
implica una transición abrupta desde una dieta
líquida (leche materna) a una dieta sólida, la
separación de la madre y el rearmado de lotes, lo
que genera un importante desafío fisiológico y
conductual (Gresse et al., 2017). Además,
durante los primeros 14 días posdestete, aumenta
la susceptibilidad a infecciones entéricas, lo que
favorece la disbiosis de la microbiota y la
inflamación intestinal (Soares et al., 2022). Este
momento de la recría coincide con la aparición
de diarreas y la caída de la ganancia diaria de
peso, resultando en importantes pérdidas
económicas (Wang et al., 2023). El empleo de
antibióticos en forma preventiva para
contrarrestar las pérdidas por diarreas tiende a ser
reemplazado debido a que contribuye a la
resistencia a los antimicrobianos, siendo una
amenaza para la salud humana y animal. Una
alternativa a su uso, es la utilización de
probióticos como promotores de crecimiento
(Perfumo, 2019). En nuestro grupo venimos
evaluando la administración de levaduras
probióticas de la especie Kluyveromyces
marxianus a lechones para inducir el
establecimiento de una microbiota adecuada
(Pendón et al., 2021b). La primera línea de
defensa del intestino es la capa de mucus de la
superficie epitelial, producida por células
caliciformes, y está formada por una gran red
polimérica de mucinas O-glicosiladas, entre ellas
la N-acetil-galactosamina (Gal-NAc), capaz de
ser aglutinada específicamente por la lectina
Glycine Max (SBA). La técnica de Periodic Acid
Schiff-Alcian Blue (PAS-AB) permite
diferenciar mucinas neutras (rojas) de ácidas
sialiladas (azul) en el mucus y en las células
caliciformes, propiedad fisicoquímica que puede
ser relevante en la adaptación al postdestete
(Brown et al., 1988b; Baum et al., 2002). El
objetivo de este trabajo fue comparar el espesor
de la capa de mucus intestinal del intestino
delgado entre un grupo de cinco cerdos
suplementados con levadura desde el destete
hasta el sacrificio (a los 5 días posdestete) y a
cuya madre se la había suplementado con
levaduras durante los últimos 20 días de
gestación y durante la lactancia (Grupo Km). Se
utilizó en el estudio un grupo control de cinco
cerdos no suplementados en ninguna condición
(Grupo control). En la necropsia, se tomaron
muestras de íleon, se fijaron en formol 10 %
durante 48 hs y se realizó la inclusión en
parafina. A partir de los bloques se realizaron
cortes histológicos de 4 μm de espesor con
micrótomo Leica Jung RM 2055, sobre los que
se aplicaron las técnicas de PAS-AB y
lectinhistoquímica. Se tomaron imágenes con
objetivo 60x con máquina fotográfica digital
Nikon DS-Fi1-U2 conectada a microscopio
Nikon Eclipse 50i (Japón) y se analizaron con
ImageJ 1.54g. En la técnica de
lectinhistoquímica, los cortes se desparafinaron,
rehidrataron y se les inhibió la enzima peroxidasa
endógena. Se realizó el bloqueo de uniones
inespecíficas con solución de albúmina sérica
bovina 1 % en PBS, se incubó cada portaobjetos
con 30 µm/ml de la lectina SBA, en cámara
húmeda, toda la noche a 4°C. Se incubaron con
el complejo estreptavidina-peroxidasa, se
revelaron con solución de DAB, se realizó una
coloración de contraste con hematoxilina y se
montaron los cortes. La reacción positiva fue
reconocida por la presencia de una coloración
pardo-dorada. En la técnica de PAS-AB se
desparafinó, rehidrató y tiñó un corte de cada
taco con AB pH 2,5, se colocó en solución de
ácido peryódico 1 % 3 minutos y en solución
reactivo de Schiff de Coleman 5 minutos. Se
realizó la deshidratación en alcohol,
aclaramiento en xilol, deshidratación y montaje.
Objetivo
Se registró el espesor del mucus coloreado en
cada técnica, considerando el promedio de 10
medidas tomadas desde la superficie epitelial
hasta la superficie luminal, con objetivo 60x. En
el grupo suplementado con levaduras
probióticas, el promedio del espesor de la capa
de mucus entre los 5 animales fue de 4,56 µm en
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Kluyveromyces en el espesor de la capa de mucus intestinal de cerdos al destete
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SBA y 3,99 µm en PAS-AB. En el grupo control,
el promedio del espesor de la capa de mucus
entre los 5 animales fue de 3,12 µm en SBA y
3,07 µm en PAS-AB.
Resultados
Los resultados obtenidos en este estudio
mostraron diferencias entre los grupos, siendo el
espesor promedio de la capa de mucus en el íleon
significativamente mayor en el grupo
suplementado con levaduras probióticas de la
especie Kluyveromyces marxianus en
comparación con el grupo control no
suplementado (Figura. 3) (Pendón et al., 2021).
Este aumento se verificó en ambas técnicas
histoquímicas: 4,56 µm con SBA (Figura. 1) y
3,99 µm con PAS-AB para el Grupo Km, frente
a 3,12 µm con SBA y 3,07 µm con PAS-AB para
el Grupo control (Figura. 2). El incremento en el
espesor del mucus es un indicador clave de una
barrera intestinal más robusta y sugiere que K.
marxianus ejerce un efecto trófico o modulador
directo/indirecto sobre el epitelio intestinal. Este
fortalecimiento es de vital importancia, ya que
una capa de mucus más gruesa ofrece una mejor
protección física contra la invasión de patógenos
y la acción de toxinas, mitigando así las
alteraciones intestinales y el impacto negativo
sobre el rendimiento productivo inducido por el
estrés posdestete. El análisis mediante PAS-AB
(que diferencia mucinas neutras de ácidas) y
lectinhistoquímica con SBA (específica para N-
acetil-galactosamina) permite inferir que la
suplementación no solo incrementó la cantidad
de mucus, sino que también estimuló la
producción de una capa con mayor cantidad de
mucinas SBA-reactivas, reforzando la red
polimérica de defensa primaria. Un aspecto
crucial de este trabajo es el diseño experimental,
que incluye la suplementación dual (madre y
lechón). La mayor robustez de la barrera
intestinal observada a los 5 días posdestete
podría ser el resultado de un efecto preparatorio
o residual de la suplementación materna, ya sea
por transferencia de metabolitos o por el
establecimiento temprano de un microbiota
beneficioso que hace al intestino del lechón más
resiliente al desafío del destete.
Conclusión
En resumen, estos hallazgos refuerzan la
hipótesis de que la suplementación con K.
marxianus es una estrategia eficaz para potenciar
la integridad estructural y funcional del intestino
del lechón, un mecanismo que va más allá de la
mera modulación de la microbiota, y se traduce
en una mejora en la primera línea de defensa de
la mucosa.
Figura 1. 60x. Lectinhistoquímica. Grupo Km.
Figura 2. 60x. PAS-AB. Grupo control.
Figura 3. Cuadro comparativo entre el promedio del
espesor del mucus en grupo Km y en grupo control.
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